ABSTRACT The objective of the present study was to evaluate the effect of lipopolysaccharide (LPS) administration on activation and apoptosis of primordial follicles. There was no difference in the total number of follicles as well as in the different types of follicles. Furthermore, the LPS challenge didn’t modulate the expression of genes related with ovarian reserve (HAM), oocyte survival (Survivin), activation rate (Pten, KIT, KITL1, KITL2, AKT1, SIRT1), and follicular abnormalities. Therefore, the LPS exposure with 24h interval had no effect on activation rate and primordial follicles abnormalities, and also had no effect on expression of anti-apoptotic genes and genes related with ovarian reserve, oocyte survival, activation rate, and primordial follicles abnormalities.

RESUMO O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da administração de lipopolissacarídeo (LPS) na ativação e a apoptose de folículos primordiais. Dez novilhas saudáveis (Bos taurus taurus), com idade média de 14 meses, alojadas em sistema de confinamento e alimentadas com TMR, foram utilizadas neste experimento. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: grupo LPS (LPS; n = 5), que recebeu duas injeções intravenosas de 0,5μg/kg de peso corporal de lipopolissacarídeo (Sigma Aldrich®) diluído em 2mL de solução salina (0,9% de NaCl), com intervalo de 24h; e grupo controle (CTR; n = 5), que recebeu duas injeções intravenosas de 2mL de solução salina (0,9% de NaCl), com intervalo de 24h. A primeira injeção de LPS foi realizada no d 1, e no d 5 os animais foram abatidos, os ovários foram pesados e as amostras dos ovários foram coletadas para avaliação histológica e molecular. Não houve diferença no número total de folículos, bem como nos diferentes tipos de folículos. Além disso, o desafio com LPS não modulou a expressão de genes relacionados à reserva ovariana (HAM), à sobrevivência oocitária (Survivin), à taxa de ativação (Pten, KIT, KITL1, KITL2, AKT1, SIRT1) e às anormalidades foliculares. Portanto, a exposição ao LPS com intervalo de 24h não teve efeito sobre a taxa de ativação e as anormalidades dos folículos primordiais, bem como não teve efeito sobre a expressão de genes antiapoptóticos e de genes relacionados com a reserva ovariana, a sobrevivência oocitária, a taxa de ativação e as anormalidades dos folículos primordiais.

RESUMO O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da administração de pST sobre o metabolismo, o tamanho testicular e a qualidade espermática de cachaços jovens. Foram usados leitões com 22 dias de idade, divididos em dois grupos: pST (n=30) e controle (n=30). O grupo pST foi submetido a injeções de pST (90µg/kg de peso vivo) a cada três dias até 330 dias de idade. Peso testicular foi avaliado aos 22, 82, 142, 202 e 365 dias de idade. Libido e qualidade do sêmen fresco foram avaliados entre 150 e 210 dias de idade. Qualidade espermática foi avaliada durante refrigeração (15ºC) por um período de 72 horas. Concentrações sanguíneas de testosterona, albumina e fósforo foram maiores no grupo pST (P<0,05). O grupo pST apresentou maior concentração de IGF-I no plasma seminal (P=0,05) e maior peso testicular, quando comparado ao grupo controle (P<0,001). O grupo pST apresentou maior volume espermático (P<0,001), concentração espermática (P=0,047) e número de doses espermáticas por ejaculado (P=0,047). Durante o período de 72 horas de refrigeração, o grupo pST teve menor número de patologias espermáticas (P<0,001). Assim, conclui-se que a administração de pST aumenta a concentração sanguínea de testosterona, o tamanho testicular e a qualidade espermática de cachaços jovens.

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the effect of pST injections on metabolism, testicular size, and sperm characteristics in young boars. Sixty 22-day old piglets were divided into two groups: pST (n=30) and Control (n=30). The pST group was submitted to pST injections (90µg/kg body weight) every three days up to 330 days of age. Blood collections were performed weekly. Testicular weight was measures at 22, 82, 142, 202 and 365 days of age. Libido and fresh semen characteristics were evaluated between 150 and 210 days of age. Semen characteristics were also evaluated during a 72h storage period (15ºC). Testosterone, albumin, and phosphorus blood concentrations were higher in the pST group (P<0.05). The pST group had a higher IGF-I concentration in seminal plasma (P=0.05) and higher testicular weight (P<0.001) compared to the Control group. The pST group had higher ejaculate volume (P<0.001), total sperm count (P=0.047) and number of inseminating doses/ejaculate (P=0.047). During the 72h storage period, the pST group had a lower number of morphological alterations (P<0.001) compared to the Control group. In sum, pST injection in young boars increased testosterone concentration, testicular size, and sperm quality.

RESUMO A hipótese deste estudo é de que o uso da combinação de butafosfan e cianocobalamina pode melhorar a resistência periférica à insulina, aumentar a quantidade de glicose disponível para a glândula mamária e a produção de leite. Assim, o objetivo foi investigar os efeitos combinados de butafosfan e cianocobalamina sobre o metabolismo da glicose em vacas leiteiras no período pós-parto. Vinte e uma vacas leiteiras foram divididas em dois grupos: grupo controle (CON, n= 11), que recebeu cinco aplicações de solução salina (20mL / animal 0,9% NaCl), e grupo Catosal(r) (ABC, n= 10), que recebeu cinco aplicações de 20mL de uma solução contendo as substâncias butafosfan e cianocobalamina (B12 Catosal(r), 100mg da substância butafosfan e 50µg de cianocobalamina por mL). As aplicações foram realizadas por via intramuscular, nos dias sete, 12, 17, 22 e 27 pós-parto. As amostras de sangue foram coletadas para a avaliação das concentrações plasmáticas de fósforo, glicose, ácidos graxos não esterificados (AGNE), albumina, aspartato aminotransferase (AST) e creatina quinase (CK). Nos dias oito e 28 pós-parto, os animais foram pesados e submetidos aos testes de tolerância à glicose e à insulina. O tratamento promoveu perda de peso (ABC 40,4kg, CON 10,73kg, P<0,05) e aumento da AST (ABC 62,92 ±3,31U/L, CON 53,11±3,49 U / L, P<0,05) e dos níveis de CK (ABC 134,09± 19,08U / L, CON 79,43 ± 18,27U / L). Os grupos não diferiram quanto ao metabolismo (área sob a curva) da glicose nos dias oito e 28, porém os animais tratados tiveram um aumento na glicemia (P<0,05) no dia 28 pós-parto (97,54 ± 8,54mg / dL), após a administração de insulina, em comparação ao dia oito (83,01 ± 8,54mg / dL). Assim, pode-se concluir que a combinação de butafosfan e cianocobalamina melhora a adaptação do metabolismo da glicose em vacas leiteiras no início da lactação.

ABSTRACT The hypothesis of this study is that the combined use of butaphosphan and cyanocobalamin could enhance peripheral insulin resistance, increasing the amount of glucose available for the mammary gland and milk production. Thus, our aim was to investigate the combined effects of butaphosphan and cyanocobalamin on the glucose metabolism in dairy cows during the postpartum period. Twenty one dairy cows were divided into two groups: Control Group (CON, n= 11), that received 5 injections of saline solution (20mL/animal 0.9 % NaCl), and Catosal group (ABC, n= 10) which received 5 injections of 20mL of a Butafosfan and Cyanocobalamin solution (Catosal(r) B12, 100mg of Butafosfan and 50µg Cyanocobalamin for mL). The injections were performed by intramuscular route, on days 7, 12, 17, 22 and 27 postpartum. Blood samples were taken on these days to evaluate plasma concentrations of phosphorus, glucose, non-esterified fatty acids (NEFA), albumin, aspartate aminotransferase (AST) and creatine kinase (CK). On days 8 and 28 postpartum, the animals were weighted and subjected to the glucose tolerance and insulin challenge tests. The treatment promoted weight loss (ABC 40.4kg, CON 10.73kg, P< 0.05) and increased AST (ABC 62.92 ±3.31U/L, CON 53.11 ±3.49U/L, P< 0.05) and CK levels (ABC 134.09 ±19.08U/L, CON 79.43 ±18.27U/L). Glucose metabolism (area under the curve) did not differ (P> 0.05) among groups on days 8 and 28; however, ABC animals showed higher serum glucose levels (P< 0.05) after insulin administration on day 28 postpartum (97.54 ±8.54mg/dL) when compared to day 8 (83.01 ±8.54mg/dL). It could be concluded that the combined use of butaphosphan and cyanocobalamin interferes positively with the adaptation of glucose metabolism in dairy cows in early lactation.

Resumo Neste estudo são apresentadas áreas de vida e estimativas mínimas de densidade populacional do gato-do-mato-pequeno (Leopardus guttulus), gato-maracajá (Leopardus wiedii) e gato-mourisco (Puma yagouaroundi) obtidas entre 2005 e 2006, no Vale do Taquari, próximo ao limite sul da Mata Atlântica no Brasil. Os dados sobre área de vida foram coletados com a utilização de telemetria convencional (VHF) em uma paisagem altamente fragmentada. A área de vida média, calculada por Kernel 95%, foi de 16,01 km2 para o gato- do-mato-pequeno, 21,85 km2 para o gato-maracajá e 51,45 km2 para o gato-mourisco. Os dados de telemetria foram utilizados para obter uma estimativa de densidade mínima de 0,08 gatos-do-mato-pequenos por km2, e 0,04 gatos-mourisco por km2. As estimativas de densidade são oriundas de áreas sem a presença de jaguatiricas (Leopardus pardalis) ou outros predadores de maior porte, todos localmente extintos, com possíveis efeitos de um tipo específico de relaxamento de mesopredadores, conhecido como “Efeito Pardalis” que podem permitir o aumento do tamanho das populações de gatos menores.

Abstract Home range and minimal population densities of Southern tiger cat (Leopardus guttulus), margay (Lepardus wiedii) and jaguarundi (Puma yagouaroundi) were estimated between 2005 and 2006 in Taquari Valley, near the southern edge of the Atlantic Rainforest in Brazil. Home range data were collected by conventional radio telemetry (VHF) locations in a highly fragmented landscape. The average home range size, calculated using 95% kernel density estimates, was 16.01 km2 for Southern tiger cat, 21.85 km2 for margay and 51.45 km2 for jaguarundi. Telemetry data were used to obtain minimal density estimates of 0.08 Southern tiger cats / km2, and 0.04 jaguarundi / km2. The density estimates arise from areas where ocelot (Leopardus pardalis) and other larger-bodied carnivores were locally extinct, and they suggest a specific type of mesopredator release known as the ocelot effect, which is likely enabling the increase in smaller felid populations in this area.

O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da administração pré-parto de rbST sobre o perfil metabólico de ovelhas induzidas à cetose subclínica, assim como sobre o metabolismo até sete dias de vida e ganho de peso até sete semanas de vida dos cordeiros. Vinte e sete ovelhas prenhas do grupo genético pantaneiro foram divididas em dois grupos: grupo rbST (n = 14) e grupo controle (n = 13). O grupo rbST recebeu duas aplicações de 1mg/kg de rbST, aos 97 e 111 dias de gestação, ao passo que o grupo controle recebeu injeções de placebo. Houve diferenças significativas entre os grupos nos níveis de GGT no período de pós-indução de cetose e concentrações de BHB no período pós-parto. As concentrações de glicose, ureia, fósforo, albumina, colesterol, AST, NEFA e insulina não foram diferentes entre os grupos nos diferentes períodos do estudo (P>0,05). Houve um efeito de rbST no peso corporal dos cordeiros já observado nos 14 dias de vida (P<0,0001), verificou-se um aumento dos níveis séricos de fósforo ao nascimento de cordeiros (P=0,0014) e albumina de sete dias de vida (P=0,0014 ), e não houve diferença entre os grupos para os outros metabólitos. Portanto, a utilização de rbST foi eficaz em aumentar o peso dos cordeiros até a sétima semana de vida. Além disso, a aplicação de rbST teve efeitos positivos no metabolismo com a redução da sobrecarga do fígado, como indicado pela diminuição da GGT após a indução da cetose e diminuição de BHB no período pós-parto.

The aim of this study was to determine the effect of prepartum rbST injection on the metabolic profile of pregnant ewes induced to subclinical ketosis, as well as the metabolism until seven days of life and weight gain until seven weeks of life of the lambs. Twenty seven pregnant ewes of the pantaneiro genetic group were used, divided into two groups: rbST group (n = 14) and control group (n = 13). The rbST group received two applications of 1 mg/kg of rbST, at 97 and 111 days gestation, while the control group received placebo injections. There were significant differences between groups in levels of GGT in the ketosis post induction period and BHB concentrations in the postpartum period. Concentrations of glucose, urea, phosphorus, albumin, cholesterol, AST, NEFA and insulin were not different between dams from the two groups in different periods of the study (P>0.05). There was an effect of rbST on body weight observed already at fourteen days of life (P<0.0001), there was an increase in serum phosphorus levels at birth of lambs (P=0.0014), and albumin at seven days of life (P = 0.0014) of the lambs, with no difference between groups for the other metabolites. Therefore, the use of rbST was effective in increasing the weight of the lambs until the seventh week of life. In addition, rbST treatment had positive effects on the dam metabolism with reduction of liver overload, as indicated by decreased GGT after ketosis induction and decreased BHB at the postpartum period.

Rumen-protected conjugated linoleic acid (CLA) reportedly improves fertility in lactating dairy cows by reducing the postpartum interval to first ovulation and enhancing the circulating insulin-like growth factor-I (IGF-I) levels. The objectives of this study were to evaluate the blood metabolites, hormones, follicular fluid (FF) and liver for the effect of CLA supplementation (50 g top-dressed daily from 15 days pre-partum to 65 days in milk -DIM -). Pre-partum Holstein cows (n = 24) were assigned to two treatments: a Control and CLA group (n = 12 cows/group). Dry matter intake (DMI) and milk production were recorded daily. At 26 DIM, ovulation was synchronized and at 34 DIM, plasma and FF were analysed for paraoxonase 1(PON) levels. Moreover plasma was analysed for IGF binding protein 2 and 3 (IGFBP). From 34 DIM, blood samples and FF from follicles >9 mm were collected and analysed for estradiol, progesterone, IGF-I and lipoproteins. A liver biopsy was performed at 65 DIM and analysed for the expression of IGF-I, growth hormone receptor (GHR), pyruvate carboxylase (PC) and cytosolic phosphoenolpyruvate carboxykinase (PECK). CLA supplemented cows, compared to the control group, recorded a significant lower milk fat production, improved DMI and energy balance and recorded significant increased plasma concentrations of IGF-I, cholesterol, low density lipoprotein (LDL) and IGFBP-3 (interaction treatment x DIM). The concentration of IGF-I, high density lipoprotein (HDL) and LDL tended to be higher in FF than plasma. This study confirms the positive effects of dietary CLA supplementation on the metabolism, by improving the energy intake and reducing the negative energy balance. Moreover, the improvement of plasma IGF-I levels observed in this study, coupled with a better energy balance support previous studies showing a positive effect of CLA supplementation on reproduction. However, CLA did not alter the plasma and the FF concentration of PON, nor the liver gene expression.

Em um delineamento experimental usando o fatorial 3x2, três crioprotetores internos, glicerol (GLI), etilenoglicol (EG) e dimetilformamida (DMF), e dois externos, gema de ovo (GEMA) e lipoproteína de baixa densidade (LDL), avaliaram-se a motilidade ao descongelamento de GLI-GEMA 53,9±1,96, sendo superior aos demais tratamentos (P<0,05). Na avaliação de morfologia ao descongelamento, não houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos EG-GEMA 68,3±1,58, EG-LDL 72,2±2,39 e DMF-GEMA 68,7±1,67 que foram mais altos que os demais (P<0,05). A avaliação de integridade de membrana por fluorescência ao descongelamento GLI-GEMA 34,2±2,28 e EG-GEMA 30,9±1,32 não diferiram entre si (P>0,05), mas foram mais elevados que os demais (P<0,05), enquanto que a HOST dos tratamentos DMF-GEMA 13,6±1,30 e DMF-LDL 9,8±0,78 diferirem entre si (P<0,05) e foram mais baixas que as demais (P<0,05). O uso de etilenoglicol associado à gema de ovo pode ser uma alternativa ao uso de glicerol nos protocolos de congelamento de sêmen de touros.

The experiment was designed as 3 x 2 factorial design, with three internal cryoprotectants, glycerol (GLY), etileneglycol (EG) and dymethilformamide (DMF) and two external, egg yolk (YOLK) and density low lipoproteina (LDL). The motility at thawing for GLY-YOLK (53.9±1.96) was higher than other treatments (P<0.05). The percentage of cells with normal morphology at thawing was not different between EG-YOLK (68.3±1.58), EG-LDL (72.2±2.39) and DMF-YOLK (68.7±1.67), but they were higher than the others (P<0.05). The evaluation of membrane integrity through fluorescent probes at thawing indicate that GLY-YOLK (34.2±2.28) and EG-YOLK (30.9±1.32) were not different (P>0.05), but were higher than the others (P<0.05). The evaluation of membrane integrity through hypoosmotic swelling test (HOST) indicate that DMF-YOLK (13.6±1.30) and DMF-LDL (9.8±0.78) were different (P<0.05) and lower than the others (P<0.05). The use of ethylene glycol associated to egg yolk can be a viable alternative to the use of glycerol in bull semen freezing protocols.

Compararam-se as concentrações de cálcio, glicose e insulina em ovelhas gestantes e não gestantes submetidas ao teste de tolerância à glicose (TTG). Oito ovelhas gestantes (GG) e oito não gestantes (NG) foram submetidas ao TTG por meio da administração endovenosa de uma solução de glicose, na dose de 500mg/kg de peso vivo. Amostras de sangue foram coletadas nos tempos de -15, zero, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150 e 180 minutos, sendo zero min o momento da infusão, para avaliação da concentração sanguínea de glicose, cálcio e insulina. Foi avaliada a taxa de metabolização de glicose e insulina, por meio do cálculo da área sob a curva (ASC). As concentrações de glicose, cálcio, insulina e a ASC da insulina não diferiram entre os grupos (P>0,05), entretanto as três últimas ASCs da glicose foram mais elevados nas gestantes (P<0,05), que correspondem ao período entre 90 e 180min. O teste de correlação de Pearson revelou correlação negativa entre concentração de cálcio e insulina nas gestantes (P<0,05). Estes resultados indicam menor taxa de metabolização de glicose em ovelhas gestantes e uma possível relação de cálcio e insulina no terço final de gestação.

The aim of this study was to investigate glucose, insulin and calcium metabolism during the Glucose Tolerance Test (GTT) in pregnant or nonpregnant ewes. Eight pregnant (PG) and nonpregnant (NPG) ewes per group received a glucose endovenosus bolus containning 500mg/kg in one minute. Blood samples were collected on -15, 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150 and 180 minutes interval (0 min - injection). These samples were used to evaluate glucose, calcium, insulin concentration, as well as insulin and glucose metabolization rate, which were determined by calculating the Area Under the Curve (AUC). The calcium, glucose and insulin concentrations were not different between groups. However, the three last glucose ASCs were higher in the pregnant group and in this group calcium and insulin blood concentrations were negatively correlated .These results showed lower glucose tolerance in pregnant ewes and suggest a link between insulin and calcium in the late pregnancy.

The aim of this work was to evaluate the number of follicles able to ovum pick up (OPU), the quantity, and quality of oocytes from donors showing different blood levels of cholesterol. For this experiment 5 crossbreed cows were used. Before the beginning of the experiment all cows received an intravaginal progesterone releasing device for 8 days. Two days before the device withdraw all cows received 0.150 mg of d-cloprostenol. The cows were submitted to ovum pick up each 4 days in a total of 6 sections. The cows were injected with 0.150 mg of d-cloprostenol each 8 days, at the moment of the device change. After the evaluation of blood cholesterol, cows were divided in two groups: G1 (cholesterol<50 mg/dl) and G2 (cholesterol>50 mg/dl). There was a difference (p<0.01) between G1 and G2 in the number of follicles/punction, 9.66 and 12.6, respectively, but we didn't observe difference in the number of recovered oocytes and its quality. These results have shown that cows with blood levels of cholesterol higher than 50 mg/dl have a higher number of follicles able to punction.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o número de folículos por punção folicular (PF), a quantidade e a qualidade de ovócitos oriundos de vacas com diferentes níveis séricos de colesterol. Para a realização deste experimento foram utilizadas 5 vacas mestiças. Antes do início do experimento, todas as vacas receberam por 8 dias um dispositivo intravaginal liberador de progesterona e dois dias antes da retirada dos dispositivos todas as vacas receberam 0,150 mg de d-cloprostenol. As sessões de PF ocorreram a cada 4 dias, totalizando 6 sessões. Os animais receberam 0,150 mg de d-cloprostenol a cada 8 dias, juntamente com a troca dos dispositivos. Após avaliação do nível sérico de colesterol, as vacas foram divididas em dois grupos: G1 (colesterol<50 mg/dl) e G2 (colesterol>50 mg/dl). Foi registrado uma diferença (p<0,01) entre o G1 e o G2 quanto ao número de folículos/punção, 9,66 e 12,6, respectivamente, não sendo observado diferença (p>0,05) no número de ovócitos coletados e na qualidade dos mesmos. Verificou-se que vacas com níveis de colesterol superior à 50 mg/dl apresentaram um maior número de folículos aptos à punção.